Vereproov tmsi jaoks, mis see on

Dieedid

Tandem-mass-spektromeetria (TMS) on üks tänapäevaseid ühendite analüüsimeetodeid, mida kasutatakse laialdaselt erinevatel teaduslikel ja praktilistel eesmärkidel. See meetod võimaldab analüüsida mitusada ühendit bioloogilise materjali jälgi.

Kust kasutatakse seda meetodit?

Maailma rahvatervise praktikas kasutatakse seda meetodit pärilike ainevahetushaiguste (NBO) vastsündinute massilise sõeluuringu läbiviimiseks. Kuiva vere kohas on aminohapete (sh fenüülalaniini) ja atsüülkarnitiinide määramine võimalik. Nende ainete kvantitatiivne määramine võimaldab välistada mitut erinevat klassi NBO kuuluvate mitmesuguste pärilike haiguste (aminohapete, orgaaniliste hapete metabolismi häired ja rasvhapete mitokondriaalse β-oksüdatsiooni defektid) kuuluvaid haigusi. Välis kirjanduse andmetel on nende üldine sagedus 1: 2000 elus vastsündinud. Varem diagnoosimiseks nende häirete nõua suuri koguseid bioloogilist materjali, on mitmed uuringud (aminohapete analüüsi, gaasikromatograafia-spektromeetria määramiseks atsüülkarnitiinide spekter), mis nõudis palju aega ja materjali kulud. TMS võimaldab teil kvantifitseerida kõik need ühendid ühes analüüsis!

Milliseid haigusi saab selle meetodi abil tuvastada?

Kahjuks pole veel olemas üht universaalset väga tundlikku ja spetsiifilist testi kõiki teadaolevate NBOde diagnoosimiseks, kuid tehnoloogiad, mille eesmärk on tuvastada mitut kümneid ja isegi sadu haigusi ühes analüüsis, on juba muutumas reaalsuseks. Need meetodid hõlmavad TMS-i. See meetod võimaldab kõrge usaldusväärsusega tuvastada ligikaudu 40 pärilikku aminohapete metaboolset häiret, orgaanilisi happeid ja rasvhapete mitokondriaalse beetaoksüdatsiooni defekte. Enamik neist haigustest esineb vastsündinutel. Selle tehnoloogia abil diagnoositavate haiguste loend on toodud analüüside osas http://labnbo.ru/prajs-list

Miks on vaja metaboolseid haigusi kõige varem diagnoosida?

Paljud arstid ekslikult arvavad, et NBO-d on nii haruldased, et neid tuleks välja jätta ainult viimati, ja väga sageli on õige diagnoos kindlaks juba hilisematel etappidel või haigus pole üldse diagnoositud.

Kuid juba on teada rohkem kui 150 NBO-de vormi, mille jaoks on välja töötatud tõhusad ravimeetodid ja patsiendi elu ja tervis sõltub sellest, kui kiiresti ja õigesti diagnoositakse. 20 haiguse puhul, mida saab TMS-iga diagnoosida, on välja töötatud spetsiaalne ravi. Aja diagnoositud - patsiendi salvestatud elu ja tervis!

Vereproovide kogumise reeglid

Veri kogutakse standardfilterkaardil (nr 903), mida kasutatakse PKU vastsündinute kuvamiseks. Veri võib olla kas kapillaar (sõrme, kreen) või venoosne. On vaja filtreerida valitud ala hästi! Filtri kaardil peab olema selgelt märgitud nimi, kelle poolt ja kust patsient, sünnikuupäev ja arstina saadetud telefoninumber. Proovi kuivatakse 2-3 tundi õhus. Soovitav on lisada ajaloo väljavõte.

Nõuetekohase vere kogumise näide:

Ebanormaalse vereproovi võtmise näited:

Palju vähe nägusid

Proov ei olnud täielikult kuivanud, mille tulemusena hägusus proov transportimise ajal.

Filterpaber oli nõrgalt leotatud veres.

Kasulikud lingid:

(NCBI) on riiklik molekulaarbioloogia teabe ressurss, mis asutati 1988. aastal. PubMedi andmebaas sisaldab rohkem kui 15 000 000 artiklit erinevatest biomeditsiini ajakirjadest (inglise keeles).

Dr V.A. loodud inimese geenide ja geneetiliste haiguste kataloog. McKusick ja tema kolleegid (inglise keeles).

(SSIEM) - pärilike metaboolsete haiguste uurimise ühing (kaasasündinud ainevahetushäired).

Föderaalne riigieelarve teadusasutus "Meditsiinilise geneetika uurimiskeskus"

Haruldaste haiguste infoportaal, haruldaste haigustega patsientide ravi ja diagnoosimise võimalused

Allorusseltside haruldaste haiguste ühing loodi 2012. aastal patsientide, nende perede ja ekspertide algatusel. Täna on WHO organisatsioon ühendanud enam kui 400 patsienti 47-st Venemaa Föderatsiooni piirkonnast, kus on 63 haruldast haigust.

Vereproov tmsi jaoks, mis see on

Paljude aastate jooksul on skriinimine põhiliselt tehtud iga konkreetse haiguse spetsiifiliste testidega. Näiteks põhineb PKU sõelumine fenüülalaniini suurenemise mikrobioloogilisel või keemilisel hinnangutel.

Tandem-mass-spektromeetri (TMS) tehnoloogia kasutuselevõtuga on olukord viimase kümne aasta jooksul täielikult muutunud. Analüüs tandemmassispektomeetria (TMS) ei saa ainult täpselt ja kiiresti avastada kõrgenenud fenüülalaniin veretäpp vastsündinul vähemate valepositiivsete reaktsioonide võrreldes vanemate meetodeid, kuid võimaldab ka tuvastada üheaegselt mitukümmend teisi biokeemilisi häired.

Mõned neist on juba individuaalsete testidega läbi vaadatud. Näiteks paljud riigid on kasutatud spetsiifilisi teste avastamiseks suurenenud metioniini, et tuvastada tandemmassispektomeetria (TMS) oli samuti puuduvad usaldusväärsed skriiningmeetod-onatalnogo teatud haiguste asjakohaste sõelumiskriteeriumit kuid puudus usaldusväärne test varem.

Näiteks MCAD defitsiit on rasvhappe oksüdatsiooni haigus, tavaliselt asümptomaatiline, kuid kliiniliselt tuvastatav, kui patsient suurendab katabolismi. MCAD defitsiidi tuvastamine sünnituse ajal võib olla oluline, kuna haigetel lastel on varases lapsepõlves väga suur eluohtliku hüpoglükeemiaoht, kellel esineb kattuvusi haigusseisundite, nagu viirusnakkus, põhjustatud kataboolsete seisundite tõttu.

Hüpoglükeemia esimeses episoodis sureb ligi neljandik diagnoosimata MCAD puudulikkusega lastest. Nõuetekohase ravi korral võib ainevahetushäire peatada. Kui MCAD on ebapiisav, on skriinimise põhieesmärk hoiatada vanemaid ja arste metaboolse dekompensatsiooni ohu kohta, kuna lapsed rütmide vahel on praktiliselt terved ja ei vaja igapäevast ravi, välja arvatud pikendatud tühja kõhuga.

Kuid vastsündinute sõeluuringus kasutatakse ka tandemmassi spektromeetriat (TMS). Lisaks paljude häirete kiire testimise tagamisele näitab ka tandem-mass-spektromeetria (TMS) ka vastsündinuid, kellel on kaasasündinud ainevahetushäired, nagu metüülmalonaan acidemia, mis tavaliselt ei kuulu skriinimisprogrammidesse nende harulduse ja raskuste tõttu viimane teraapia, mis kaitseb progresseeruva neuroloogilise seisundi halvenemise eest.

Tandeme mass-spektromeetria abil avastatud haigused

I. Aminoatsüdeemia:
- PKU
- Uriini haigus vahtrasiirupiga
- Homotsüstiinuria
- Tsitrullinemia
- Arginiini suhkruvastane atsüuuria
- Türosineemia tüüp I

Ii. Orgaaniline acidemia:
- Propioonhappeid
- Metüülmaloniidhape
- Isovaleriinhape
- Isolustatud 3-metüül-krotonüül-glütsiinium
- Glutaarhape (tüüp I)
- Mitokondriaalne atsetoatsetüül-koa-tiolaasi vaegus
- Hüdroksümetüülglutarhapeet
- Mitme CoA-karboksülaasi ebaõnnestumine

III. Rasvhapete oksüdatsiooni rikkumine:
- SCAD ebaõnnestumine
- Hüdroksüdefitsiidi puudus
- MCAD-i rike
- VLCAD ebaõnnestumine
- LCAD puudus ja trifunktsionaalne valgufitsiit
- Glutaarhappeemia tüüp II
- Karnitiini palmitoüültransferaasi II puudulikkus

Tandem-mass-spektromeetria (TMS) võib samuti tuvastada ebatavalisi metaboliite, mille määramatus tervise väärtuses on. Näiteks SCAD puudus on teine ​​rasvhappe oksüdatsioonihaigus, mis on kõige sagedamini asümptomaatiline, ehkki mõnedel patsientidel võib olla episoodiline hüpoglükeemia. Seega on positiivse tandemi mass-spektromeetria (TMS) analüüsi prognoositav väärtus sümptomaatilise SCAD puhul tõenäoliselt väga madal.

Kas SCAD-i puuduse tuvastamise eelis ületab testi negatiivse mõju, mis põhjustab põhjendamatut vanemate ärevust enamiku vastsündinute jaoks, kellel on positiivne testi tulemus, mis kunagi ei näidanud kliinilisi sümptomeid? Seega ei vasta kõik tandeme massispektromeetriaga (TMS) tuvastatud haigused vastsündinute skriinimise kriteeriumidele.

Sellepärast väidavad mõned tervishoiusüsteemi eksperdid, et vanematele ja arstidele tuleb ainult rääkida kõrvalekaldest metaboliitidel, kellel on tõestatud kliinilised eelised. Muud advokaat kasutada kõiki esitatud andmeid tandemmassispektomeetria (TMS) ja pakkumise informeerima arste ja lapsevanemaid ebatavalise metaboliidid, ükskõik kui hea haiguse kriteeriumid vastavad standard vastsündinute skriinimine. Tulevikus saate hoolikalt jälgida tundmatute anomaaliatega patsiente. Kõigil neil põhjustel on ka tandem-massispektromeetria (TMS) kasutamine vastsündinute sõelumiseks.

Sünnitusperioodil populatsiooni skriinimiseks kasutatakse tavaliselt kahte testi: vanemate naiste kromosomaalne analüüs ja emaka seerum AFP või kolmekordne DNT ja kromosomaalse aneuploidsuse test.

Kui rasedus on ohus, kuna in - invasiivsete protseduuride sünnieelse diagnostika kromosoomide aneuploidsusi tõttu ema vanus, peaks ka pakkuda lisakontrolli, näiteks määramine AFP tase lootevesi, genoomi võrdlev hübridisatsiooni otsida ohtlike submikroskoopiliste kustutamised mutatsioone skriining tsüstiline fibroos ja muude ühise tervisehäired.

Vereproov tmsi jaoks, mis see on

Tandem-mass-spektromeetria on üks tänapäevaseid ühendite analüüsimeetodeid, mida kasutatakse laialdaselt erinevatel teaduslikel ja praktilistel eesmärkidel. See meetod võimaldab analüüsida mitusada ühendit bioloogilise materjali jälgi. Maailma rahvatervise praktikas kasutatakse seda meetodit pärilike ainevahetushaiguste (NBO) vastsündinute massilisel sõeluuringul. Kuiva vere kohas on aminohapete (sh fenüülalaniini) ja atsüülkarnitiinide määramine võimalik. Nende ainete kvantitatiivne määramine võimaldab välistada mitut hulgast pärilikke haigusi, mis kuuluvad erinevatesse NBO klassidesse (aminohapete, orgaaniliste hapete metaboolsete häirete ja rasvhapete mitokondriaalse b-oksüdatsiooni defektid). Varem diagnoosimiseks nende häirete nõua suuri koguseid bioloogilist materjali, on mitmed uuringud (aminohapete analüüsi, gaasikromatograafia-spektromeetria määramiseks atsüülkarnitiinide spekter), mis nõudis palju aega ja materjali kulud. TMS võimaldab teil kvantifitseerida kõik need ühendid ühes analüüsis! Aminohapete, orgaaniliste hapete metaboliidide pärilikud häired ja rasvhapete mitokondriaalse beetaoksüdatsiooni defektid sisaldavad ligikaudu 100 nosoloogilist vormi, millest enamik ilmneb neonataalses perioodis. Nende sagedus on üle 1: 5000 elus vastsündinud. Paljud arstid ekslikult arvavad, et selle rühma haigused on nii haruldased, et neid tuleks jätta välja ainult viimati, ja väga sageli on õige diagnoos kindlaks juba hilisemates etappides või haigus pole üldse diagnoositud.

Analüüsi käigus määrati kindlaks 52 näitajat (aminohapped ja atsüülkarniinid)

Testimismaterjal: kapillaarkõrv kuivas vormis

Uuringu ettevalmistus: nr

Vastuvõtupäevad: meditsiinikeskuse lahtiolekuaegadel

№ НБО1, vastsündinu skriinimine. "PINGULUS" (aminohapete ja atsüülkarnitiinide spektri analüüs)

  • Sarnased haigusjuhtumid perekonnas.
  • Lapse ootamatu surmajuhtumid perekonnas varases eas.
  • Lapse seisund järsult halveneb pärast lühiajalist normaalset arengut (asümptomaatiline periood võib olla mitu tundi kuni mitu nädalat).
  • Ebatavaline keha ja / või uriini lõhn ("magus", "hiir", "keedetud kapsas", "higine jalg" jne).
  • Neuroloogilised häired - teadvuse häired (letargia, kooma), erinevad konvulsioonikahjustused, lihaste toonuse muutused (lihase hüpotoonia või spastiline tetrapares).
  • Hingamisrütmi häired (bradüpnea, tahhüpnia, apnoe).
  • Muude elundite ja süsteemide häired (maksakahjustus, hepatosplenomegaalia, kardiomüopaatia, retinopaatia).
  • Vere ja uriini laboratoorsete parameetrite muutused - neutropeenia, aneemia, metaboolne atsidoos / alkaloos, hüpoglükeemia / hüperglükeemia, maksaensüümide aktiivsuse tõus ja kreatiinfosfokinaasi, ketoonuuria tase.
  • 37 päriliku ainevahetushaiguse täiendav diagnostika koos kohustusliku riikliku programmiga 5 päriliku haiguse tuvastamiseks: vastsündinute skriinimine: "PECHET".

Uurimistulemuste tõlgendamine sisaldab teavet raviarsti kohta ja ei ole diagnoos. Käesolevas jaotises esitatud teavet ei saa kasutada enesediagnostika ja enesehoolduse jaoks. Arst teeb täpset diagnoosi, kasutades nii uuringu tulemusi kui ka vajalikku teavet muudest allikatest: anamnees, teiste uuringute tulemused jne.

Mõõtühikud laboratooriumis INVITRO: μmol / l.

HEREDITAARTEHNOLOOGILISTE AINETE LABORATSIOON

TMSi analüüsi näitajad

Aminohapete, orgaaniliste hapete ja mitokondrite b-oksüdatsiooni defektide kaasasündinud ainevahetushäirete kliiniline diagnoosimine võib osutuda keeruliseks, kuna neil haigustel pole spetsiifilisi spetsiifilisi märke ja sümptomeid. Sellepärast võib uute vastsündinu patoloogiate osakondade patsientide, laste intensiivravi osakondade uurimine aidata nende pärilike haiguste kiiret avastamist.

TMS-meetodi näitel atsüülkarnitiinide ja aminohapete uurimiseks on järgmised:


7. Vere ja uriini parameetrite muutused - trombotsütopeenia, neutropeenia, aneemia, metaboolne atsidoos / alkaloos, hüpoglükeemia / hüperglükeemia, maksaensüümide ja kreatiinfosfokinaasi taseme tõus, ketoonuuria.

Geneetilised analüüsid

Tütarlapsed viitasid neuropatoloogile geneetikale (ta ütles, et peaaju halvatus ei ole meie diagnoos, kuigi ta võttis ravi sanatooriumile niikuinii). Räägi mulle, kes selle üle sai, kui palju see on umbes? Ma ei tea ikkagi, mis meile saadetakse, aga ma tahaksin teada, millised summad valmistuda, see ei ole üldine vereanalüüs...

Mobiilrakendus "Happy Mama" 4.7 Rakenduses suhtlemine on palju mugavam!

Ma ei saa öelda. kõik võib olla. ja kõik on erinevad

Andsime palju asju! Kariotüüp 4000 rubla, TMS 4000 rubla, 4 korda aminohapete urineerimiseks 4 korda (kõigile 10 000 rubla), 4-kordse vere aminohapete ka umbes 10 000 rubla, Drave'i sündroom 12 000 rubla, laktaat mitu korda, konsultatsioonid ise ei ole odav geneetika ja veel palju " trivia. "Geneetiline sõelumine ei ole odav!

Multi-steroidne vereanalüüs: oluliste inimese hormoonide määratlemine kvalitatiivselt uuel tasemel

Mõiste "mitmesteroidne analüüs" viitab steroidhormoonide profiili kindlaksmääramisele gaasikromatograafia-mass-spektromeetria abil. Kõiki analüüsi tulemusi tähistatakse terminiga "steroidiprofiil". Põhimõtteliselt on need kaks samaväärset terminit sama.

Multisteroidanalüüs on kodumaine areng, analüüsimeetod on valideeritud ja sertifitseeritud kui "steroidhormoonide massikontsentratsiooni mõõtmise meetod (meetod) vereproovides, kasutades vedelkromatograafiat - tandemmassi spektromeetriat MU 08-47 / 376", mis registreeritakse ROSSTANDARTi registris RF numbri all.1.31.2015.21875.

Praegu ei ole mittesteroidne analüüs lisatud Vene Föderatsiooni tervishoiuministeeriumi poolt heakskiidetud testide loetellu ja see viiakse läbi teadusliku uuringu osana. Patsiendid ise peavad selle analüüsi maksma tasuma. Käimas on töö, millega tagatakse, et tulevikus kuuluvad need kulud kindlustusmeditsiini.

Põhiliste steroidhormoonide ja nende metaboliitide kvantitatiivne määramine seerumis või süljes olevas vedelikus standardmeetodil - tandemkromatograafia-massispektromeetria (teaduslikus kirjanduses seda meetodit nimetatakse ka kui LC-MS / MS) on aeganõudev ja kulukas protseduur. Meetodi peamine omadus on võime määrata kõik deklareeritud analüütid ühe analüüsi käigus (joonis 1), mistõttu ühe analüüdi puhul saadakse määramise maksumus peaaegu vähem kui alternatiivsete immunokeemiliste meetoditega.

Joonis 1. Analüüsid, mis määrati ühe analüüsi käigus vastavalt meetodile

Miks on biomaterjali nimetus "veri" tehnika nime all?

Selleks, et kohe tuvastada selle erinevus tuntud analüüsist "steroidne uriiniprofiil". Tuleb märkida, et uriini analüüsi teabesisus on täiesti erinev ja nõuab erinevat tõlgendamist, kuna uriin sisaldab enamasti mitteaktiivseid steroidide vorme: sulfaate, glükuroniide ja hüdroksüülitud derivaate, mis on organismile juba tarbetud ja saadud sellest. Veres määratakse kindlaks üldine verevarustussüsteemis ringlevate aktiivsete steroidhormoonide kontsentratsioonid, mis sisenevad rakkudesse ja avaldavad signaali mõju genoole.

Milliste meditsiiniliste tingimuste kohaselt on näidatud steroidide vereprofiil, millised arstid aitavad diagnoosiga steroidide vereprofiili?

1. Neerupealise koorega (VDCN) mitmesugused kaasasündinud funktsioonihäired. VDCH on kaasasündinud haigus, mis väljendub steroidide biosünteesi rikkumises. Selle põhjuseks on ühe neljast 5 neerupealise koore ensüümi düsfunktsioon. See võib olla 21a-hüdroksülaasi (CYP21) või 11b-hüdroksülaasi (CYP11B1) defitsiit. HBRA-i vastsündinute tavapärane skriinimine immunotestiga annab sageli 17-hüdroksüprogesterooni määramisel valepositiivseid tulemusi. Seetõttu on kõigil vaidlusalustel juhtudel vajalik LC-MS / MS-meetodi kinnitav diagnoosimine [1]. Mitokesksilika vormi VDKN (NF VDKN) diagnoosimine immunokeemiliste meetoditega on märkimisväärne probleem, seetõttu NF VDKN-i sageli ei diagnoosita vastsündinute skriinimise ajal, vaid see tekitab ennast järgmisena: noorukid arendavad enneaegseid kehalisi juuksed, akne; tüdrukutega, hirsutism, menstruaaltsükli häired ja suguelundite häired. NF VDKN-i steroidi profiilil on iseloomulik 21-deoksükortisooli ja 17-OH-progesterooni tõus, mistõttu geneetilise testimisega kombineeritud mittesteroidne analüüs on selle haiguse diagnoosimiseks äärmiselt kasulik.

2. Neerupealiste puudulikkus. Selleks viiakse läbi AKTH-ga stimuleerimiskatse ja mõõdetakse kortisooli, aldosterooni ja 11-deoksükortisooli taset: basaal, 30 ja 60 minutit pärast stimuleerimist. Esmasel neerupealiste puudulikkusel ei reageeri aldosteroon stimulatsioonile, teisese puudulikkuse korral registreeritakse selle taseme tõus. Kontrollgrupis tõusis 11-deoksükortisooli sisaldus AKTH-i stimuleerimisel 15-20 korda, kortisool suurenes umbes 3 korda [2].

3. Hüpogonadism meestel. Hüpogonadismi õige diagnoosimine meestel nõuab massispektromeetria abil kogu testosterooni (TT) täpse taseme määramist. Uuringus 10 000 vabatahtliku kohta leiti, et hüpogonadismi võib diagnoosida, kui mass-spektromeetri järgi on TT kontsentratsioon alla 12,1 nmol / l [3].

4. Asendusravi kontroll meestel ja naistel (HAR). Selles patsientide kategoorias on massispektromeetria "kullastandard", kuna see võimaldab valida hormooni (või stimulaatori) korrektse terapeutilise annuse, jälgida üksikasjalikult kõigi metaboliitide reaktsiooni asendusravi ja vältida immuunkeemiliste meetodite häirimist [4-6].

5. On väga oluline jälgida steroidhormoonide taset raseduse ja ühe aasta jooksul pärast sünnitust. Multi-steroidne analüüs annab palju täpsemat teavet androgeense seisundi kohta võrreldes traditsioonilise DHEA-sulfaadiga.

6. Günekoloogia. Neerupealiste närvisüsteemi viriliseerivatel (androgeeni tekitavatel) kasvajatel on androgeenide tootmine ja need põhjustavad viiruse sündroomi arengut naistel. On kindlaks tehtud, et peaaegu iga hormonaalselt aktiivne munasarja kasvaja võib olla androgeenide ja / või östrogeenide ülemäärase tootmise allikas ning see tuleks diagnoosida tandemmasssi spektromeetria meetodil [7].

7. Diabeet. See haigus mõjutab närvisüsteemi ja mõjutab neurosteroidide kontsentratsiooni. LC-MS / MS võimaldab määrata neuroaktiivsete steroidide kontsentratsiooni, et töötada välja uusi lähenemisviise diabeetilise nefropaatia ravis [8].

8. Spordimeditsiini. Steroidide profiil sportlastel veres ja süljes võib anda olulist teavet nende tervise, sobivuse ja koormuse optimaalse jaotuse tõttu koolituse läbimise kohta.

Mitmes-steroidne analüüs raskendab eluks elukoha loomist, võttes arvesse immunoloogiliste analüüside meetodite laialdast kasutamist ja traditsiooniliste tehnoloogiate toetajatest tingitud vastupanuvõimet. Kuid selle meetodi taga on tulevik, on see juba tunnustatud meditsiiniteaduse parimaks esindajaks [9].

Mis on ALS?

Amüotroofiline lateraalskleroos on motoorse neuronihaiguse kõige sagedasem vorm, mis on neurodegeneratiivne haigus, mis mõjutab aju ja seljaaju motoorseid neuroneid.

ALSi diagnoosimine

ALS-i sümptomid võivad inimestel erineda, sest haigusel on individuaalne iseloom ja progresseerumise määr.

Amüotroofilist lateraalskleroosi on äärmiselt raske diagnoosida mitmel põhjusel:

  • see on haruldane haigus;
  • varased sümptomid on üsna kerged, nagu näiteks kohmakus, ebamugavustunne kätes või veidi nõrk kõne, mis võib olla täiesti erinevate põhjuste tulemus;
  • haigus mõjutab iga inimese erinevalt, puudub kindel sümptom, mis selgelt määratleb ALSi.

Kui terapeudil on kahtlus, et tal on ALSi patsient, peaks ta viitama talle neuroloogile. Seejärel võib inimesel olla mitmeid diagnostilisi uuringuid, mida saab läbi viia nii ambulatoorsetel kui ka statsionaarsetel osakondadel.

Vereanalüüs

Uuringud näitavad, et kreatiinkinaasi sisaldus veres on suurenenud. Seda ensüümi toodetakse, kui lihaskoe hävib, ja selle taset võib ALSiga inimestel suurendada. Kuid see näitaja ei ole ALSi spetsiifiline märk, kuna see võib olla teiste haiguste näitaja.

Elektroonikromüograafia (ENMG)

ENMG-ga kasutatakse üksikute lihaste närviimpulsside registreerimiseks õrnaid nõelu. Salvestamine toimub harilikult igast harulistest ja kuulmislihastest. Inverteeringut kaotanud lihased on leitud, kuna nende elektritoiming erineb tervete lihaste aktiivsusest. ENMG tulemused võivad normidest erineda, isegi kui kindel lihas haigust veel ei mõjuta.

Kui ENMG kontrollib impulsi kiirust piki närvikiudusid. Selle saavutamiseks läbib väikest impulssi väikese tihendiga, mis puutub kokku nahaga. See on väga oluline uurimismeetod.

Transkraniaalne magnet stimulatsioon (TMS)

See on uus meetod, mida saab läbi viia samaaegselt ENMGiga. Selle eesmärk on hinnata aju motoorsete neuronite seisundit. TMS-i tulemused võivad aidata diagnoosida.

Magnetresonantstomograafia (MRI)

MRT võib tuvastada närvisüsteemi kahjustusi, mida põhjustab insult, Alzheimeri tõbi, Parkinsoni tõbi, sclerosis multiplex, kasvajad ja seljaaju ja aju vigastused. MRT ei avalda ALS-i spetsiifilisi muutusi, kuna selle haiguse tekitatud kahju ei mõjuta pilte. Seda uurimismeetodit kasutatakse ALS-sarnaste sümptomitega haiguste välistamiseks.

Muud meetodid

Neuroloog võib otsustada viia läbi täiendavaid uuringuid, nagu nimmepunktsioon või lihaste biopsia, kui midagi näitab nende vajadust. Kuid neid katseid ei kasutata alati ALSi diagnoosimisel.

Tandem taotlus
mass-spektromeetria (HPLC-MSMS)
kliinilises diagnoosimisel

Massispektromeetria on kliinilise keemia väljaarendamine, tulevik, kus kliinilise diagnostika pööre viib massispektromeetria laialdase kasutamise.
(Michael Ulerich, kliinilise keemia osakond, Georg-August University, Göttingen, Saksamaa)

Kliinilise biokeemia ülevaate kohaselt avaldatud ülevaate kohaselt on kliinilistes laborites viimase kümne aasta jooksul tohutult suurenenud kõrgsurvevedelikkromatograafia ja tandemmasssi spektromeetria (HPLC-MS / MS) kasutamine kliinilistes laborites. Autorid märgivad, et HPLC-MS / MS analüüsi spetsiifilisus on madala molekulmassiga molekulide analüüsimisel oluliselt parem immunoloogiliste meetodite ja klassikalise kõrgefektiivse vedelikkromatograafia (HPLC) suhtes ning sellel on gaasikromatograafia-massispektromeetria (GC-MS) oluliselt kõrgem tulemuslikkus. Selle meetodi populaarsust rutiinsetes kliinilistes analüüsides selgitab hetkel meetodi ainulaadne võimekus.

    HPLC-MS / MS meetodi peamised eelised on:

  • Väikesemolekulide täpse kvantitatiivse analüüsi võimalus;
  • Mitme sihtühendi üheaegne analüüs;
  • Ainulaadne spetsiifilisus;
  • Kiire analüüs.
  • Viimastel aastatel on suurt tähelepanu pööratud analüüsiajale ja sellest tulenevalt ka laboratoorse produktiivsuse suurenemisele. Analüüsi aja oluliseks vähendamiseks oli võimalik kasutada HPLC / MS / MS lühikest analüütilist kolonni, suurendades samas analüüsimise spetsiifilisust järsult. Ioniseerimise meetodi kasutamine atmosfäärirõhul (API), tandem kolmekordne kvadrupoolne massispektromeeter ja täiustatud kõrgefektiivne vedelikkromatograafia ning proovide ettevalmistamise sobivad meetodid viisid HPLC-MS / MS kliiniliste uuringute kaasaegsete analüütiliste meetodite esirinnas.

      HPLC / MS / MS peamised kasutusvaldkonnad kliinilises meditsiinis on:

  • Steroidide (steroidide paneelid), puriinide ja pürimidiinide ja muude ühendite,
    vastsündinu skriinimine kaasasündinud ainevahetushäirete korral (ühe analüüsi käigus on mitu tosinat haigust);
  • Uuringute terapeutiline seire - immunosupressandid, perivosudorozhnyh, retroviirusevastased ravimid, antikoagulandid ja kõik muud - olenemata tootja komplektide olemasolust. Teil ei ole vaja osta kalliseid komplekte iga aine jaoks - võite välja töötada oma meetodid;
  • Kliiniline toksikoloogia - rohkem kui 500 uimastiühendi ja nende metaboliitide analüüs ühes analüüsis ilma kinnitava analüüsita
    proteoomika ja metaboloomika.
  • Lisaks sellele kasutatakse HPLC-MSMSi uriini oligosahhariidide, sulfatiidide, pika ahelaga rasvhapete, pika ahelaga sapphapete, metüülmaloonhappe, porfüüriuuringute, puriini kahjustusega patsientide ja pürimidiini metabolismi uurimiseks.

    Näited vedelkromatograafia rakendamisest
    kombinatsioonis tandemmasssi spektromeetriaga kliinilistes analüüsides.

    Uute vastsündinute skriinimine. Esimene näide HPLC-MS / MS massiliseks kasutamisest kliinilises diagnoosimisel oli vastsündinutel kaasasündinud ainevahetushäirete skriinimine. Praegu arenenud riikides on see tavapärane meetod ja hõlmab rohkem kui 30 erinevat haigust, sealhulgas atsetandeemia, aminoatsidopaatiat ja rasvhappe oksüdatsiooni defekte. Erilist tähelepanu tuleb pöörata sünnidefektide uurimisele, mis võivad põhjustada tõsiseid probleeme, kui viivitamatult ei võeta meetmeid (nt laienenud süda või maks või ajuturse). HPLC-MS / MS-i kasutamine vastsündinute skriinimiseks on võime analüüsida kõiki aminohappeid ja atsüülkarnitiine kiiresti, odavalt ja spetsiifiliselt.

    Ravimpreparaadi jälgimine: immuunsupressiivse siroliimuse (rapamütsiini) väljatöötamine ja kasutuselevõtmine organismi äratõukereaktsiooni ärahoidmiseks pärast transplantatsiooni oli üks peamisi stiimuleid HPLC-MS / MS-i kasutuselevõtmiseks kliinilistesse laboritesse. Praeguse HPLC-MS / MS meetod võimaldab samaaegselt määrata takroliimust, siroliimust, tsüklosporiini, everolüümi ja mükofenohapet.

    HPLC-MS / MS-d kasutatakse ka tsütotoksiliste, retroviirusevastaste ravimite, tritsükliliste antidepressantide, antikonvulsantide ja muude ravimite puhul, mis vajavad individuaalset manustamist.

    HPLC-MSMS meetod võimaldab varfariini R- ja S-enantiomeeride eraldamist ja kvantitatiivset määramist kontsentratsioonivahemikus 0,1-500 ng / ml.

    Narkootilised ja analgeetilised ained: proovi ettevalmistamise lihtsuse ja lühikese analüüsi aja tõttu kasutatakse laialdaselt neid ühendeid analüüsides HPLC-MS / MS. Praegu kasutatakse meetodit kliinilistes laborites, et uurida paljude narkootiliste ainete esinemist. Meetodi ainulaadne spetsiifilisus ja tundlikkus võimaldavad analüüsida ühe prooviga rohkem kui 500 erinevate klasside ühendeid, minimaalse proovi ettevalmistamisega. Niisiis, uriini analüüsi korral piisab proovi lihtsast lahjendamisest 50-100 korda. Analüüsides juukseid, mitte 100-200 juuksekarvu, on ühe juuksed piisav, et usaldusväärselt tuvastada uimastitarbimise fakte.

    Endokrinoloogia ja steroidide analüüs: HPLC-MS / MS on paljudes endokrinoloogia laborites laialdaselt kasutatud steroidide - testosterooni, kortisooli, alksterooni, progesterooni, estriooli ja paljude teiste - analüüside jaoks.

    D3 ja D2-vitamiini veresuhkru määramiseks hakkavad üha enam laboratooriumid kasutama HPLC-MS / MS.

    I. Steroidide määratlus (steroidiprofiil).

    Haiglates ja kliinikutes olevad laborid suudavad praegu läbi viia HPLC / MS / MS abil mitmete steroidide üheaegset määramist. Samal ajal ei ole vaja suurt proovi mahtu, mis on laste proovide analüüsimisel eriti oluline.

      Juhud, mille puhul on soovitatav määrata mitu steriidi (profiili) steroidid:

  • Kaasasündinud adrenoomide hüperplaasia (kaasasündinud adrenaalse hüperplaasia, CAH) on kaasasündinud defitsiit steroidide biosünteesis. See on pärilik haiguste rühma, mis on põhjustatud neerupealiste koore ensüümide ebaõigest tegevusest ja mille tagajärjeks on kortisooli produktsiooni vähenemine. SANi usaldusväärseks diagnoosimiseks on soovitatav määrata kortisool, androsteenedioon ja 17-hüdroksüprogesteroon. HPLC / MS / MS võimaldab kõigi kolme steroidi täpset kvantitatiivset määramist ühes analüüsis 100% täpsusega.
  • Imikutel põhinevate vastsündinute tavapärast sõeluuringut iseloomustab positiivsete ja valenegatiivsete tulemuste kõrge tase. HPLC / MS / MS mitte ainult kortisooli, vaid ka aldosterooni ja 11-deoksükortisooli määramine võimaldab eristada neerupealise koore primaarset ebapiisavust sekundaarsest.
  • HPLC / MS / MS võimaldab prostatiidi ja kroonilise vaagnavalu sündroomi steroidide määramist.
  • HPLC-MS / MS võimaldab teil määrata steroidide profiili ja tuvastada noorukitel esineva enneaegse puberteedi põhjuseid, mis on seotud neerupealiste koorega. Leiti, et testosterooni, androsteendiooni, dehüdroepiandrosterooni (DHEA) ja selle sulfaadi kontsentratsioon neil lastel oli veidi suurem kui kontrollgrupi vanematel lastel.
  • Aktiivsete suitsetajate, passiivsete suitsetajate ja mittesuitsetajate vereseerumit analüüsitakse 15 steroidhormoonide ja kilpnäärme hormoonide olemasolu kohta, et uurida suhet suitsetamise ja hormooni kontsentratsiooniga patsientide vahel.
  • HPLC / MS / MS kasutatakse teatud naiste steroidhormoonide profülaktikaks uriinis.
  • HPLC / MS / MS abil hinnati neuroaktiivsete hormoonide kontsentratsioone, et vältida diabeetilist neuropaatiat.
  • Ii. Kilpnäärmehormoonide määramine

    Tüüphormoonide määramise tavalised meetodid põhinevad tavaliselt radioimmunoloogilisel analüüsil, mis on kallis ja võimaldab määrata ainult T3 ja T4, mis võib piirata võime määrata ja täielikult kontrollida kilpnäärme funktsioone.

    • Praegu, kasutades HPLC-MSMS-i, tehakse samaaegne analüüs viie kilpnäärme hormooni seerumiproovides, sealhulgas türoksiini (T4), 3,3 ', 5-trijodotüroniini (T3), 3,3', 5'- (rT3), 3, 3'-dijodotüroniin (3,3'-T2) ja 3,5-dijodotüroniin (3,5-T2) kontsentratsioonivahemikus 1-500 ng / ml.
    • HPLC / MS / MS meetodit kasutatakse ka türoidektoomia läbinud patsientide hormoonide koostise analüüsimiseks. Määratakse türoksiini (T4), trijodotüroniini (T3), vaba T4 ja stimuleeriva kilpnäärme hormooni (TSH) kontsentratsioonitasemed pärast operatsiooni. HPLC / MS / MS on osutunud suurepäraseks viisiks suhte kindlakstegemiseks TSH ja kilpnäärmehormooni kontsentratsioonide vahel.
    • HPLC / MS / MS meetodit kasutati türoksiini (T4) määramiseks süljas ja inimese seerumis. Meetodit iseloomustab suur reprodutseeritavus, täpsus ja avastamispiir 25 pg / ml. Uuringud on näidanud, et etiüroid-subjektide ja Graves'i haiguse all kannatavate patsientide seas esineb T4 kontsentratsioonis seedeelundite diagnoosimine.

    Praegu on HPLC / MS / MS meetodil tundlikkus, spetsiifilisus ja täpsus, mis on vajalik kõigi steroidide usaldusväärsuse kindlakstegemiseks bioloogilistes vedelikes ja suurendab seeläbi diagnoosimisvõimalusi, eriti steroidi komplektide määramisel.

    III. 25-oksüvitamiini D määramine HPLC / MS / MS abil

    25-hüdroksü-vitamiin D (25OD) on D-vitamiini peamine tsirkuleeriv vorm ja selle aktiivse vormi prekursor. (1,25-dioksivitamiin D). Pikaajalise poolväärtusaja tõttu on D-vitamiini staatuse määramisel patsiendi kehas 25 ND määramine oluline. D-vitamiin eksisteerib kahes vormis: D3-vitamiin (kolekaltsiferool) ja D2-vitamiin (ergokaltsiferool). Mõlemad vormid metaboliseeritakse vastavateks 25OD vormideks. Analüütiliste meetodite olemasolu, mis suudab määrata kõrge täpsusega mõlemat vitamiini vorme ja võimaldab jälgida D-vitamiini kahjustatud patsiente, on diagnoosimiseks väga tähtis. Senised meetodid ei võimaldanud eraldi määrata D2-vitamiini ja D3-d. Lisaks sellele on D2-vitamiini kõrge kontsentratsiooniga alahinnatav D3 tuvastatav kogus. Teine puudus on radioaktiivsete isotoopide kasutamine. HPLC / MS / MS meetodi kasutamine võimaldas mitte ainult vältida radioaktiivsete isotoopide kasutamist, vaid ka mõlema vitamiini aktiivse vormi eraldi määramist.

        Meetod kehtib järgmiste patsientide kohta:

  • Kui te arvate, et D-vitamiini sisaldus kehas on madal;
  • Kui kahtlustatakse seletamatut toksilist toimet;
  • D-vitamiini madala sisaldusega patsientidel läbiviidud ravi uurides;
  • HPLC / MS / MS kasutamine võimaldas mõlema vormi eraldi määramist patsiendi jälgimisel.
  • Iv. Immunosupressantide määramine HPLC / MS / MS abil

    Pärast elundite siirdamist on kogu elu vältel vaja võtta immunosupressante, et vältida tagasilükkamisreaktsiooni. Väga kitsa terapeutilise vahemiku ja kõrge toksilisuse tõttu vajavad immunosupressandid maksimaalse efekti saavutamiseks individuaalset annust. Seetõttu on oluline jälgida peamisi immuunsupressante: tsüklosporiini A, takroliimust, siroliimust ja everoliimust, et kontrollida iga patsiendi ravimi annuseid sõltuvalt ravimi kontsentratsioonist veres.

    Immuunanalüüsi kasutatakse endiselt loetletud ravimite jälgimiseks, kuid need meetodid on kallid ja nende spetsiifilisus, täpsus ja reprodutseeritavus on piiratud. Immunoloogiliste meetoditega saadud tulemuste põhjal on patsiendid surma saanud immunosupressantide sobimatust annusest. Praegu asendatakse immunoloogilised analüüsid HPLC / MS / MS kliinilistes laborites. Seega, Müncheni ülikooli kliinikus analüüsitakse iga päev umbes 70 proovi siroliimuse ja tsüklosporiin A sisalduse kohta, kasutades HPLC / MS / MS süsteemi. Seadme kogu proovide ettevalmistamist ja juhtimist teostab üks töötaja. Selle meetodiga lülitub labor läbi takroliimuse analüüsi.

    • Kirjeldatud on HPLC / MS / MS kasutamist takroliimuse, siroliimuse, askomitsiini, demetütsisiroliimuse, tsüklosporiini A ja tsüklosporiini G rutiinseks määramiseks veres. Vahemik määratakse kontsentratsiooniga 1,0- 80,0 ng / ml. Tsüklosporiin 25-2000 ng / ml. Aasta jooksul analüüsiti laboratooriumis üle 50 000 proovi.
    • Kuna leiti, et takroliimuse ja siroliimuse samaaegsel manustamisel on positiivne terapeutiline toime, töötati välja kliiniliste analüüside jaoks eraldi vereproovi määramiseks vereplasmas ja HPLC / MS / MS meetod. Ühe proovi analüüs võtab kogu analüüsikõvera jaoks 2,5 minutit täpsusega 2,46% - 7,04% takroliimuse ja 5,22% - 8,30% siroliimuse kohta. Takroliimuse määramise alumine piir oli 0,52 ng / ml, siroliimus - 0,47 ng / ml.

    V. Homotsüsteiini määramine HPLC / MS / MS abil

    Homotsüsteiin on huvitatud südame-veresoonkonna haigustest (trombemboolia, südamehaigus, ateroskleroos) ja muudes kliinilistes tingimustes (depressioon, Alzheimeri tõbi, osteoporoos, tüsistused raseduse ajal jne). Olemasolevad homotsüsteiini testid, sealhulgas immunoloogilised testid, on kallid. Suurte proovide analüüsimisel on välja töötatud kiire HPLC / MS / MS meetod homotsüsteiini analüüsimiseks rutiinsel kliinilisel kasutamisel. Ionisatsioon viidi läbi elektropihustusmeetodil. Meetod on reprodutseeritav, väga spetsiifiline ja täpne. Meetodi eelised on ka reagentide madal hind ja proovide ettevalmistamise lihtsus. On võimalik analüüsida 500 või enam proovi päevas.

    Järeldus

    Tuleb märkida, et kuigi praegu kasutatakse oluliselt immuunanalüüsi meetodeid tehniliste põhipiirangute tõttu, pole sellel meetodil kunagi täpsus ja spetsiifilisus siht-aine suhtes, mis on võrreldav HPLC-MSMS-iga, eriti metaboliitide esinemise korral. See ei põhjusta mitte ainult ELISA meetodi madalat täpsust ja suurt valepositiivsete ja valenegatiivsete tulemuste protsenti, vaid ka ei võimalda ELISA meetodil saadud tulemuste võrdlemist erinevates kliinilistes osakondades. HPLC-MS / MS kasutamine kõrvaldab selle puuduse, võimaldab suure hulga proovide väga spetsiifilist, täpset ja kiiret analüüsi, kusjuures suur usaldus on metaboliitide olemasolu ja seonduvate ja endogeensete ainete interferentsi puudumine patsientide plasmas ja veres.

    Vaatamata vahendikompleksi ilmselt suurtele kuludele, nagu maailmapraktsioon näitab, töötab see kompleks korralikult 1-2 aastaga. See tuleneb peamiselt ühe analüüsi madalast maksumusest kümnete ja sadade ühenduste samaaegse analüüsi tõttu ning vajaduseta osta kallid diagnostikakomplektid. Lisaks sellele on laboril võimalus sõltumatult välja töötada kõik vajalikud analüüsimeetodid ja mitte sõltuda komplektide tootjalt.

    Instrumendi kompleksi õige konfigureerimise valimine

    Massispektromeetria meetodeid on palju ja mass-spektromeetriid on välja töötatud mitmesuguste ülesannete lahendamiseks - alates keeruliste valkude makromolekulide struktuurilisest identifitseerimisest, mis kaaluvad sadu tuhandeid Daltonit kuni väikeste molekulide rutiinse suure jõudlusega kvantitatiivse analüüsini.

    Ülesande edukaks lahendamiseks on üks põhitingimustest õige seadmete valik. Ühtegi universaalset seadet, mis võimaldab lahendada terve hulk analüütilisi ülesandeid, puudub. Seega ei saa mikroorganismide identifitseerimise probleemi lahendamiseks mõeldud seade vähese molekuli kvantitatiivset analüüsi läbi viia. Ja vastupidi. Tõsiasi on see, et hoolimata tavalisest nimest, on need erinevad füüsikalised põhimõtted, mis töötavad täiesti erinevalt. Esimesel juhul on see laser-ionisatsioonallikas MALDI-TOF laser-mass-spektromeeter ja teises etapis kolmikkvadropool koos elektropihustus-ionisatsiooniga, HPLC-MSMS.

    Teine kõige olulisem parameeter on õige süsteemi konfiguratsiooni valimine. Massispektromeetria seadmete jaoks on mitu suurt tootjat. Igal tootja seadmel pole mitte ainult oma tugevaid külgi, vaid ka nõrkusi, mida nad tavaliselt eelistavad vaikida. Iga tootja toodab oma seadmete rida. Ühe analüütilise kompleksi hind on vahemikus 100 000 kuni 1 000 000 või rohkem dollarit. Optimaalse tootja valik ja seadme korrektne konfiguratsioon ei päästa mitte ainult olulisi rahalisi vahendeid, vaid ka ülesande tõhusamat lahendamist. Kahjuks on laborite varustamiseks palju näiteid, mis neid tegureid arvesse ei võta. Tulemus - jõudeolekus seadmed, raisata raha.

    Kolmas tegur, mis määrab labori edu, on personal. Massispektromeetrid nõuavad kõrgelt kvalifitseeritud personali. Kahjuks ei ole ühel ülikoolil Venemaal kaasaegne praktiline massispektromeetria, eriti seoses kliiniliste rakendustega, ning iga labori personali väljaõppe ülesanne tuleb lahendada üksi. Loomulikult on tootja poolt pärast seadme käivitamist läbi viidud 2-3-päevane tutvustuskursus täiesti ebapiisav, et mõista meetodi põhialuseid ja omandada oskusi seadmesse.

    Neljas tegur on valmis analüüsimeetodite puudumine. Igal laboril on oma prioriteedid, mille jaoks on vaja välja töötada oma meetodid. Seda saab teha isik, kellel on seadmega vähemalt 2-3 aastat kogemusi. Tootmisettevõtted pakuvad mõnikord ühte või kahte üldist soovituslikku laadi meetodit, kuid ei kohandanud seda labori spetsiifiliste ülesannetega.

    LLC "BioPharmEkspert" on spetsialiseerunud mitmeaastane kogemus mitmesuguste massispektromeetritega, samuti meetodite väljatöötamine ja kõrgefektiivsete analüüside väljatöötamine. Seetõttu pakume järgmisi teenuseid:

    1. Seadme optimaalse konfiguratsiooni valimine kliendi konkreetsete ülesannete jaoks.
    2. Tandemmass-spektromeetri juhtivate tootjate seadmete ostmine, tarnimine ja käivitamine. Personali järkjärguline väljaõpe aasta jooksul alates seadmete käivitamise hetkest.
    3. Põhiliste kliiniliste probleemide lahendamiseks valmis meetodid ja andmebaasid.
    4. Analüüsimeetodite väljatöötamine ja kliendi konkreetsete ülesannete lahendamine tema laboris tema personali kaasamisega.
    5. Metoodiline toetus kõikidel tööetappidel.

    Esialgse derivatiseerimisega seotud vereanalüüs (TMS-derivaadid)

    Kaksmõõtmeline gaasikromatograafia - lennu ajaline massispektromeetria preparaadi esialgse derivatiseerimisega (TMS-derivaatide) plasma analüüsimiseks, mis näitab glükoos 5TMSi määramist

    Vereplasma metaboliitide analüüs kahe-mõõtmelise gaasikromatograafiaga - lennu ajaline massispektromeetria ja esialgse derivatiseerimisega (TMS-derivaatidega) näitab 5TMS-i glükoosi avastamist, mille juhuslik määr on 901.